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Revista toxicológica en línea

Reproducción asistida mediante el uso de hormonas en la rana cubana Osteopilus septentrionalis. (Anura: Hylidae)

nº16 [jun - ag 2008 ] Retel
06/06/2008

Trujillo Hernández. J., Carballo Hondal. O., Sais Guerra. Y. Centro Nacional de Toxicología. Ciudad de la Habana. Cuba.

Correspondencia:
Centro Nacional de Toxicología. Dirección: Calle 114 y Ave 31. Marianao. Ciudad de la Habana. Cuba. Teléfono: 260 7821, 260 3252. e-mail: [email protected]; [email protected]

Resumen

Reproducción asistida, es un grupo de técnicas cuyo objetivo es lograr la reproducción y /o obtención de huevos o embriones con diversos fines, mediante el empleo de diferentes técnicas: estimulación hormonal de la ovulación y espermatozoides, inseminación artificial, fertilización in Vitro. La estimulación de los ovarios de la rana con el fin de obtener óvulos maduros se consigue empleando hormonas como la HCG (gonadotropina coriónica humana), la FSH (hormona folículo estimulante), la LH (hormona luteinizante), la GnRH (hormona liberadora de gonadotropinas), en combinaciones múltiples y en dosis variables. En el país no existían antecedentes de resultados en la aplicación de estas técnicas en la especie cubana O. septentrionalis (rana platanera). Los objetivos de este trabajo son, lograr la obtención de huevos de la rana Osteopilus septentrionalis en condiciones de laboratorio y determinar el protocolo más indicado a seguir en la técnica de la reproducción asistida para esta especie. La selección de dosis y esquema de aplicación, tuvo su base en las guías ASTM, FETAX, OECD; así como en los resultados publicados por: Herkovits. J y Pérez-Coll. C.S., Rend. G. M., Bantle. J. A. y Agostinho. C.A. Lograr que los animales se adaptaran a las condiciones de laboratorio por más de 120 días de cautiverio y al tipo de alimentación a base de alimento vivo (lombrices de tierra) constituyó la primera etapa, y la segunda, consistente en determinar las dosis y tipo de hormona a aplicar, siguiendo el principio de no sacrificar a los animales. Se probaron diseños basados en el empleo de dosis única y repetida de HCG y la combinación de una dosis de FSH más dos dosis de HCG. Los resultados esperados se obtuvieron cuando se combinó una dosis de 0.007 mg FSH / g pv a ambos sexos y 24 horas después dos dosis de HCG, a los machos (200 y 400 UI) y a las hembras (400 y 800 UI) con un intervalo de cinco horas entre la primera y la segunda dosis de HCG. Tras la última inyección fueron apareados machos y hembras en acuarios de 40 x 20 x 20 cm, ubicadas a la oscuridad y a una temperatura ambiental de 24 ± 1 0C. Al día siguiente se obtuvieron de 1 000 a 1 400 huevos, con un por ciento de fertilización superior al 75 %, un 0 % de malformación y más del 80 % de sobrevivencia al estadio embrionario E-13 (Gosner 1960). Se concluye que la O. septentrionalis puede reproducirse en condiciones de laboratorio y el protocolo más indicado para la ovulación y fecundación de los huevos, fue empleando la combinación de FSH más HCG.

Palabras claves: Osteopilus septentrionalis, reproducción, FSH, HCG

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Abstract

ASSISTED REPRODUCTION BY USING HORMONES IN THE CUBAN FROG Osteopilus Septentrionalis. (Anura: Ranidae)

Assisted reproduction consists of a group of techniques  for achieving reproduction or attaining eggs or embryos for different purposes and using diverse approaches (hormonal stimulation of ovulation and spermatozoids). The stimulation of the frog’s ovaries, aimed at obtaining mature eggs is possible by the use of hormones in multiple combinations and with variable dosis.
In Cuba, there is not previous history of results applying these techniques on the Cuban specie Osteopilus Septentrionalis ("tree frog",). The objectives of this research were obtaining eggs from this frog under laboratory conditions and determining the most recommended protocol for applying the assisted reproduction to this specie. The dosis and schedule of application were based on the guides ASTM, FETAX, OECD, as well as on the results published by: Herkovits.J and Pérez-Coll, C.S.,Rend.G.M.,Bantle.J.A and Agostinho.C.A. Designs were tested based on the use of single and repeated dosis of HCG and the combination of FSH plus HCG. The expected results were seen when a dose of 0.007 mg FSH/gpv was administered to both sexes and 24 hours after two dosis of HCG. Next day, around 1000-1400 eggs were produced, with a fertilization per cent higher than 75,  a 0% of malformation and more than 80% of survival to the embryonary stage E-13 (Gosner 1960). It was concluded that O. Septentrionalis can be reproduced under laboratory conditions and the most appropiate protocol for the ovulation and fecundation of eggs was the combination of FSH and HCG.

Keywords: Osteopilus Septentrionalis, reproduction, FSH ,HCG.

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