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Revista toxicológica en línea

In Vitro Genotoxic Potential of D-003 on the Blood Lymphocytes Chromosomal Aberration Test.

nº38 [Marzo 12- Octubre 12] Retel
16/10/2012

Rafael Gámez Menéndez, Ariadne Gutiérrez Martínez, Rosa Mas Ferreiro, Balia Pardo Guerra, Haydee García Cambian, Isury Bucarano Lliteras

Centro de Productos Naturales. Centro Nacional de Investigaciones Científicas.
Autor para correspondencia: Dr.C. Rafael Gámez Menéndez
Dirección: Calle 198 e/ 19 y 21 Atabey, Playa, C. Habana.
Teléfono: 2714225, 2714200, 2714212
Correo electrónico: [email protected]  
In Vitro Genotoxic Potential of D-003 on the Blood Lymphocytes Chromosomal Aberration Test.

Abstract

Background: D-003, a mixture of very high molecular weight aliphatic acids purified from sugarcane wax, has been shown antioxidant, lipid-modifying and antiosteoporotic properties in preclinical and clinical studies.
Objective: This study investigated the in vitro genotoxic potential of D-003 to produce chromosomal aberrations (CA) in peripheral blood lymphocytes.
Methods:  Fresh suspensions of D-003 were added (1 000, 2 500 and 5 000 g/mL) to cultures with (microsomal liver fraction S9 mix) or without metabolic activation. Concurrent negative (Tween/water vehicle) and positive controls (cyclophosphamide 15 g/mL and mitomicyn-C 0.3g/mL in the tests with and without metabolic activation, respectively) were included. Two hundred (200) metaphases by group were examined and the numbers and frequencies of cells with aberrations and the mitotic index were quantified.
Results: D-003 added up to 5 000µg/mL of culture did not induce chromosomal aberrations in presence or not of S9 mix compared with negative controls and no trends with the doses were observed. Positive controls evidenced increases of the numbers and frequencies of CA. Mitotic indexes were unchanged with the treatment, which indicates that D-003 does not affect cell proliferation.
Conclusions: D-003 added in vitro (1 000-5 000 ­µg/mL) to peripheral blood lymphocyte cultures did not show evidences of cytotoxic or genotoxic potential in the CA test.

Keywords: D-003, sugar cane wax acids, antioxidants, antiosteoporotic substances, lipid-modifying substances, chromosomal aberrations test, lymphocyte cultures.

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Resumen

Potencial genotóxico del D-003 en el ensayo de Aberraciones cromosómicas in vitro en linfocitos.
Introducción: El D-003, mezcla de ácidos alifáticos de alto peso molecular purificado de la cera de la caña de azúcar, presenta actividad antioxidante, hipolipemiante y antiosteoporótica en modelos experimentales y en ensayos clínicos.
Objetivo: Investigar el potencial genotóxico in vitro del D-003 en el ensayo de aberraciones cromosómicas en cultivo de linfocitos de sangre periférica.
Métodos: Se adicionó a  cultivos de linfocitos suspensions de D-003 (1 000, 2 500 and 5 000 mg/ml) con y sin la presencia de activación metabólica (mezcla de fracción microsomal hepática). Se empleó como control negativo el tween 65/en agua y como controles positive la ciclofosfamida (15 mg/ml) y la mitomicina-C (0.3 mg/ml). Se analizaron 200 metafases por grupo de tratamiento, cuantificando la el número de células con aberraciones y el índice mitótico.
Resultados: El D-003 adicionado hasta dosis de 5 000µg/mL cultivo de linfocitos no  indujo aberraciones cromosómicas en presencia o no de mezcla S9, resultados comparables con el control negativo, no se evidencio tendencias al incremento de las aberraciones cromosómicas con la dosis. Los controles positivos empleados incrementaron la frecuencia de aberraciones cromosómicas. El índice mitótico no cambió con el tratamiento con D-003, lo cual indica que no afecta la proliferación celular.
Conclusiones: El tratamiento con D-003 (1 000 – 5 000 mg/mL) in vitro a linfocitos de sangre periférica no mostró evidencias de potencial citotóxico o genotóxico en el ensayo de aberraciones cromosómicas.

Palabras claves: D-003, ácidos de la cera de la caña de azúcar, antioxidante, antiosteoporótico, hipolipemiante, aberraciones cromosómicas, cultivo de linfocitos.

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