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Revista toxicológica en línea

Hemotoxicity activity caused by acrilamide on the peripheral erythrocytes of ZEBRAFISH (Danio rerio)

nº59 [Agosto 19 - Noviembre 19] Retel
04/11/2019

Hernández, C, Álvarez, M, Perdomo, L, Rodríguez-Acosta, A

Haemotoxicity activity caused by acrilamide on the peripheral erythrocytes of ZEBRAFISH (Danio rerio)

Abstract

Acrylamide (ACR) is a 2 alkene monomeric reagentused to synthesize polymers for industrial application. Evaluating its haematological toxicity action has been a preponderant objective of worldwide concern since the chemical was detected in human umbilical cord blood. In this work, its toxicity (ACR) in adult zebrafish (Danio rerio) peripheral blood was tested maintaining the fishes during 8 days in a 0.50 mM ACR LC50 and normal controls. Haemoglobin (Hb) analysis was performed by cellulose acetate electrophoresis.The activity ofδ-aminolevulinic acid dehydratase (ALAD) determination by spectrophotometric method was used as a toxicity biomarker. DNA analysis of nucleated erythrocytes in blood extensions contrasted with Feulgen staining was also performed. All these data were processed through the Fiji-ImageJ program platform and the GraphPad Prims statistic-7. The controls, from the peripheral blood electrophoretic profiles showed two main bands of globin, and one secondary minor band. Otherwise, those treated with ACR showed one main globin band and three minor bands, in the electrophoresis. The ALAD enzyme activity showed a 20% reduction compared with the controls. The erythrocytes presented nuclear DNA fragmentation in 80% of the analysed erythrocyte population, with respect to the control erythrocyte population. The haematocrit evaluation was higher in peripheral blood treated with ACR. The current study showed that ACR altered the structure of peripheral blood Hb, probably through the generation of ACR-Hb and / or ACR-GB type adducts, which may be expressed in the weakest bands found. In addition, it was possible to demonstrate that ACR can inhibit the enzymatic activity of ALAD, serving as a possible biomarker of haemotoxicity. The preceding was also accompanied by an apoptosis process evidenced through Feulgen staining. In conclusion, the ACR has haemotoxic activity in addition to the well-known neurotoxicity already reported, which could jeopardize the activity of oxygen supply in the blood and compromise processes in human foetal development. Key words: Apoptosis, Acrylamide, Erythrocytes, Haemoglobin adducts, Toxicity.  Download PDF (369 KB)

Resumen

Actividad de hemotoxicidad causada por acrilamida en los eritrocitos periféricos de ZEBRAFISH (Danio rerio). 
La acrilamida (ACR) es un reactivo monomérico de alqueno tipo 2 utilizado para sintetizar polímeros para aplicaciones industriales. La evaluación de su acción de toxicidad hematológica ha sido un objetivo preponderante de preocupación mundial desde que se detectó el químico en la sangre del cordón umbilical humano. En este trabajo, se analizó su efecto (ACR) en sangre periférica de pez cebra adulto (Danio rerio) manteniendo los peces durante 8 días en un LC50 ACR 0,50 mM y controles normales. El análisis de hemoglobina (Hb) se realizó mediante electroforesis con acetato de celulosa. La actividad de la determinación de la deshidratasa del ácido δ-aminolevulínico (ALAD) por método espectrofotométrico se usó como un biomarcador de toxicidad. También se realizó un análisis de ADN de eritrocitos nucleados en extensiones de sangre en contraste con la tinción de Feulgen. Todos estos datos se procesaron a través de la plataforma del programa Fiji-ImageJ y la estadística GraphPad Prims-7. Los controles, de los perfiles electroforéticos de sangre periférica mostraron dos bandas principales de globina y una banda secundaria. De lo contrario, los tratados con ACR mostraron una banda de globina principal y tres bandas menores, en la electroforesis. La actividad de la enzima ALAD mostró una reducción del 20% en comparación con los controles. Los eritrocitos presentaron fragmentación de ADN nuclear en el 80% de la población de eritrocitos analizada, con respecto a la población de eritrocitos de control. La evaluación del hematocrito fue mayor en la sangre periférica tratada con ACR. El estudio actual mostró que ACR alteró la estructura de la Hb de sangre periférica, probablemente a través de la generación de aductos de tipo ACR-Hb y / o ACR-GB, que pueden expresarse en las bandas más débiles encontradas. Además, fue posible demostrar que ACR puede inhibir la actividad enzimática de ALAD, sirviendo como un posible biomarcador de hemotoxicidad. Lo anterior también fue acompañado por un proceso de apoptosis evidenciado a través de la tinción de Feulgen. En conclusión, el ACR tiene actividad RETEL Sertox © Copyright 2003 Pág/67 hemotóxica además de la conocida neurotoxicidad ya informada, lo que podría poner en peligro la actividad del suministro de oxígeno en la sangre y comprometer los procesos en el desarrollo fetal humano.
Palabras clave: apoptosis, acrilamida, eritrocitos, aductos de hemoglobina, toxicidad. Descargar PDF (369 KB)