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Revista toxicológica en línea

Cardiotoxicidad inducida por veneno crudo en Mapanare (Bothrops colombiensis) en modelo experimental de embrión de pollo “In vivo” e “In Vitro”

nº27 [mar10] Retel
20/03/2010

Marco Álvarez1*, María Eugenia Girón2, José Miguel Ercolino3, Elizabeth Suárez1, Lourdes Perdomo1, Alexis Rodríguez-Acosta2

1Sección de Microscopia Electrónica, Instituto Anatómico “José izquierdo”, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.
2Sección de Inmunoquímica, Instituto de Medicina Tropical, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.
3Laboratorio de Morfologías Anormales, Instituto Anatómico José izquierdo, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.

*Autor de correspondencia: Dr. Marco Alvarez: Telf. 0212-6053439.
e-mail: [email protected]
http://www.med.ucv.ve/IA/SecMicElec.htm

Resumen

En el presente trabajo se evaluó la cardiotoxicidad inducida por una concentración subletal cincuenta (CSL50) de veneno crudo de Bothrops colombiensis, en modelo experimental de embrión de pollo “in vivo” e “in vitro”. El uso del Videocardiograma (VCG) y el ensayo metabólico con el colorante vital Verde Janus, permitió determinar “in vivo”, la Frecuencia Cardiaca Promedio (FCP) y los niveles de oxido-reducción en embriones de pollo de 3½ y 4 días de desarrollo, antes y después del tratamiento. El área vascular embrionaria fue analizada. La incubación de mioblastos cardiacos, cultivados en Gota pendiente, con  3,3 dimetiloxicarbonocianida (DiOC1 (3), permitió determinar “in vitro”,  el marcaje de mitocondrias y su modificación morfológica en la población de las células controles y tratadas. La FCP  de embriones tratados, presento un  18%, de reducción significativa respecto al grupo control. El colorante vital Verde Janus, mostró  un cambio  en el nivel de oxido-reducción de la porción lumbar-torácico embrionaria, acompañado de numerosos núcleos hemorrágicos. El área vascular presento neo-vascularización. A nivel celular,  se observo la disrupción de la monocapa celular, con perdida de la confluencia, homogeneidad y extensión del halo de crecimiento. Los mioblastos presentaron formas redondeadas y numerosos filamentos citoplasmáticos. La estructura mitocondrial perdió su morfología ortodoxa. Se observo una redistribución de la fluorescencia hacia la estructura nuclear.  Estos resultados permiten sugerir que probablemente el veneno de B.colombiensis pudiera estar promoviendo la activación de factores mitocondriales y otras vías constitutivas de muerte celular. En la actualidad, los conocimientos relativos a la cadiotoxicidad son limitados; por lo que se hace necesaria la realización de nuevos estudios exhaustivos en esta área.

Palabras claves: B. colombiensis, veneno crudo, CSL50, frecuencia cardiaca promedio (FCP), Videocardiograma (VCG), oxido-reducción, Verde Janus, mitocondria, DiOC1 (3).

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Abstract

AbstractCardiotoxicity induced by Mapanare (Bothrops colombiensis) crude venom on chicken embryo  in vivo and in vitro experimental model
The research evaluated the cardiotoxicity induced by half sub-lethal concentration (SLC50) of crude venom of Bothrops colombiensis, “in vivo” and “in vitro”. The average heart rate, changes in embryonic oxidation-reduction levels as well as mitochondria structural condition on the cardiac myoblasts grown-up in primary Hanging-drop culture incubated with DiOC1(3), before and after an hour of treatment, were measured. The Videocardiogram (VCD), the shift from blue to pink in the vital dye Janus Green and redistribution of fluorescence was used to estimating changes. Chick embryos of 3 ½ and 4 days of development, subject to the SLC50 of crude venom showed 18% significant reduction in heart rate. The reduction in heart rate was accompanied by changes in oxidation-reduction level in thoracic-lumbar area of the embryo, with the presence of nucleus bleeding. A rapid angiogenic response was observed.  At cellular level, there is a disruption of the cell monolayer, loss of convergence, uniformity and extent of the halo of growth. The myoblasts lose the star form, rounded shapes and numerous cytoplasm filaments appearing. The mitochondria structural are lost, together with the homogenous appearance of fluorescence.  These results allow suggesting that probably B.colombiensis poison should be promoting the activation of factors mitocondriales and other constitutive routes of cellular death. At present, the knowledge relative to the cadiotoxicidad is limited; by what there becomes necessary the accomplishment of new exhaustive studies in this area. 
Keyword: B. colombiensis, crude venom CSL50, cardiotoxicity, average heart rate (FCP), video-cardiogram (VCD), oxidation-reduction,  Janus Green, mitochondria , DiOC1 (3).

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